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Secuenciación: Método enzimático (Sanger)

Secuencia degradación

Hoy en día, el método más usado para la secuenciación de ácidos nucleicos es el método de Sanger. Sin embargo, es justo decir que el método de Maxam-Gilbert es el más adecuado para determinar la secuencia de fragmentos cortos de ADN, debido a que puede determinar la secuencia desde la primera base. En cambio, el método de Sanger sólo permite la lectura a partir de la base 10-20.

Secuencia degradación

Ventajas y desventajas

El método de Sanger tiene varias ventajas sobre el método de Maxam-Gilbert. Las reacciones de secuenciación del método enzimático se pueden realizar en unas horas, en cambio las del método de Maxam-Gilbert tardan al menos un día. Las reacciones del método de Sanger son más “puras”, con menos contaminantes que puedan afectar la resolución del gel. Sin embargo la mayor dificultad era que los ddGTPs no estaban disponibles comercialmente. Desde entonces se ha experimentado con variaciones del protocolo original y se han realizado grandes avances en la automatización de este método.

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Sofía Ramos
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Gerente de ventas LSG

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